Gotham wird mittlerweile von der neu gegründeten Injustice League regiert, die unter anderem die Stadtteile an unterschiedliche Schurken aufgeteilt hat. Harley Quinn weigert sich jedoch, der neuen Schurken-Gruppe beizutreten und tritt stattdessen mit ihrer eigenen Truppe gegen die Liga an, um Gotham aus den Klauen der bösen Crew zu befreien.
Als Harley Quinn zu der Erkenntnis kommt, dass der Joker sie nicht wirklich liebt, trennt sie sich von dem Superschurken und beschließt, ihre eigene Crew an Bösewichten zusammenzustellen. Schnell holt sie dafür neben Ivy Poison auch Doctor Psycho, King Shark, Sy Borgman un Clayface ins Boot. Doch auch mit der neuen Crew kann sie sich nicht vollends vom Joker trennen.
Harley Quinn wird von der US-amerikanischen Schauspielerin Kaley Cuoco gesprochen, die unter anderem für ihre Rolle in der Sitcom The Big Bang Theory sowie die Hauptrolle in der neuen Serie Flight Attendant bekannt ist.